結直腸癌分子檢測的基本要求
1. 對不可切除晚期或復發性CRC患者進行抗EGFR單克隆抗體治療之前，推薦進行RAS（KRAS/NRAS）突變檢測（強烈推薦）。
幾個隨機臨床研究表明，抗EGFR單克隆抗體治療不能使KRAS外顯子2、3、4和NRAS外顯子2、3、4突變患者獲益。這也在大規模META分析中得到證實，不論抗EGFR單克隆抗體類型（西妥昔單抗或帕尼單抗）、聯合化療和化療類型如何，都發現這種趨勢的可重復性。
2. 推薦經認證的有效方法如體外診斷對腫瘤組織樣本進行RAS突變檢測（強烈推薦）。
檢測RAS突變的方法包括：(i)PCR為基礎的特異性檢測技術，如等位基因特異性PCR和PCR-rSSO；(ii)擴增靶基因再直接測序
3. 晚期或復發性CRC患者一線治療之前，推薦進行BRAF V600E突變檢測（推薦）。
BRAF V600E突變是CRC患者預后不良的獨立預測指標。最近有研究報道，三聯化療（FOLFOXIRI）氟尿嘧啶（5-FU）+奧沙利鉑+伊立替康聯合貝伐珠單抗對不可切除晚期或復發性BRAF V600E突變的CRC患者更有效。歐洲醫學腫瘤學協會（ESMO）共識指南也推薦三聯化療+貝伐珠單抗是BRAF V600E突變患者的最佳選擇。
4. 對腫瘤組織樣本直接進行測序（結合手工顯微解剖）或使用PCR為基礎的方法檢測BRAF V600E突變（推薦）。
在以往的研究中，直接測序的突變檢出限為10%-25%。其他方法的突變檢出限為1% - 10%。考慮到這些不同的檢測方法對該預后不良指標顯示一致性結果，建議檢測BRAF V600E突變的檢出限為1%～10%。
實施各基因檢測的時間和種類
參考文獻：
Kentaro Yamazaki,et al.Japanese Society of Medical Oncology Clinical Guidelines:Molecular Testing for Colorectal Cancer Treatment, Third Edition.2018 Jun;109(6):2074-2079.
